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Programa da disciplina
Aulas teóricas
1. Engenharia Genética - definições e conceitos
gerais
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DNA recombinante |
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Clonagem |
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Organismos transgénicos |
2. Mecanismos genéticos básicos
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Ácidos núcleicos |
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Replicação do DNA |
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Transcrição do DNA |
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Tradução do mRNA |
3. Extracção de ácidos núcleicos
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DNA genómico de tecidos animais, plantas e
bactérias |
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Fragmentos de DNA |
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RNA total de eucariotas e procariotas |
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mRNA |
4. Manipulação enzimática de ácidos núcleicos
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Enzimas de restrição |
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Polimerases |
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Fosfatases e cinases |
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Exonucleases |
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Endonucleases |
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Ribonucleases |
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Ligases |
5. PCR - "Polymerase chain reaction"
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Descrição da técnica |
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Vantagens e desvantagens |
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RT-PCR ("Reverse transcriptase-PCR") |
6. Vectores de clonagem
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Plasmídeos |
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Fago l e bacteriófagos relacionados |
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Fagos filamentosos |
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Cosmídeos |
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Fagos P1 (PAC's) |
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YAC's |
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BAC's |
7. Bibliotecas de DNA genómico e cDNA
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Conceitos gerais |
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Produção de bibliotecas de DNA genómico |
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Produção de bibliotecas de cDNA |
8. Técnicas de análise de DNA e RNA
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Electroforese em gel de agarose |
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Electroforese em gel de poliacrilamida |
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"Southern blotting" |
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RFLP - "Restriction Fragment Length
Polymorphism" |
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"Northern blotting" |
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"Ribonuclease protection assay" |
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DNA "Fingerprinting" |
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DNA "Footprinting" |
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Métodos de detecção de alterações
genéticas |
9. Sequenciação de DNA
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Método químico ou Maxam-Gilbert |
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Método enzimático ou Sanger-Coulsom |
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Sequenciação automática de DNA com
fluorescência |
10. Mutagénese in vitro
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Estratégias de mutagénese |
11. Mapeamento e sequenciação do genoma humano
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Mapeamento por "linkage" genético |
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Mapeamento físico |
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"Proteomics" |
12. Genética molecular e recursos informáticos
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Recolha e armazenamento de dados |
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Interpretação de dados |
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Bases de dados de mapeamento genómico |
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Bases de dados de sequências de ácidos
núcleicos e proteicas |
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Bases de dados bibliográficas |
13. Técnicas de análise de expressão proteica
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Electroforese de proteínas |
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Técnicas de coloração geral |
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"Western blotting" |
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Imunoprecipitação |
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ELISA - "Enzyme Linked Immunosorbent
Assay" |
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Imunohistoquímica |
14. Produção de proteínas recombinantes
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Expressão em células procariotas |
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Expressão em células eucariotas |
15. Organismos transgénicos
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Estratégias de produção |
Aulas práticas
Nas
aulas práticas serão realizados os seguintes trabalhos práticos:
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1.
Amplificação de DNA genómico por PCR.
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2.
Estudo da expressão de um gene humano por RT-PCR.
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3.
Pesquisa e identificação de mutações num gene humano. |
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4.
Consulta e utilização de recursos informáticos em genética molecular.
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Os
trabalhos práticos implicam a elaboração de relatórios.
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